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一、基因工程

1. 基因工程的诞生

1)基因工程:依照人们的志愿,进行严厉的规划,并通过体外 DNA 重组和转基因等技能,然后创造出更契合人们需求的新的生物类型和生物产品。

2)基因工程诞生的理论根底是在生物化学、分子生物学和微生物学科的根底上发展起来,技能支持有基因搬运载体的发现、东西酶的发现,DNA 组成和测序仪技能的创造等。

2..基因工程的原理及技能

(3)基因工程操作顶用到了约束酶、DNA 连接酶、运载体

考点约束酶细化:

约束酶首要从原核生物生物中别离纯化出来,这种酶在原核生物中的效果是辨认 DNA 分子的特定核苷酸序列,而且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

 约束酶的特性是辨认特定核苷酸序列,切开特定切点。约束酶发作的结尾有两种:粘性结尾平和结尾。

 DNA 连接酶与 DNA 聚合酶的效果部位是磷酸二酯键,二者在效果上的差异为前者是康复被约束性内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,后者单个的核苷酸连接到DNA分子上。

 作为基因工程的载体应该具有符号基因、多个约束性内切酶切点、能够在宿主细胞内仿制和安稳存等特色。邯郸电视台张涵

⑤ 常见的载体品种有质粒、动植物病毒、噬菌体

4)基因工程四进程:意图基因的获取、基因表达载体的构建、将意图基因导入受体细胞、意图基因的检测和表达。

考点细化:

 意图基因的获取办法为依据基因的核苷酸序列、基因的功用、基因在载体上的方位、基因的转录产品、以及基因的表达产品蛋白质等特性来获取意图基因。

 全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus基因文库、基因组文库、cDNA 文库的差异:含有某种生物不同基因的许多DNA 片段,导入受体菌的集体中贮存,各个受体菌体别离含有这种生物的不同基因,称之为基因文库。假如含有一种生物一切基因,叫做基因组文库。只包含一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,如cDNA 文库。

 基因重组操作中构建基因表达载体的意图是将意图基因在受体细胞中安稳存在,而且遗传给下一代,一起意图基因能够表达和发挥效果。

 一个完好的基因表达载体包含:意图基因、启动子、终止子、符号基因。

 将意图基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的常用办法别离是脓杆菌转化法、显微打针法、Ca2+处理法。

 基因工程的方云霄受体细胞挑选,植物能够选用体细胞,动物不能用体细胞,一般选用受精卵细胞。由于受精卵具有万能性。

 当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2+处理细胞,这样做的意图是使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA 分子的感受态细胞。

 意图基因的检测:转基因生物的 DNA 是否插入了意图基因(DNA分子杂交技能);

   意图基因是否转录出了 mRNA(分子杂交技能);

   意图基因是否翻译成蛋白全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus质(抗原-抗体杂交);

   个别生物学水平判定(直接调查和检测性状)。

 意图基因的获取、基因表达载体的构建、意图基因的检测和表达一夜神应龙般需求碱基互补配对。将意图基因导入受体细胞不需求碱基互补配对

3. 基因工程的运用

5)在农业出产上:首要用于进步农作物的抗逆才干(如:抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改进农作物的质量和运用植物出产药物等方面。

6)基因医治不是对患病基因的修正,基因检测所用的 DNA 分子只要处理为单链才干与被检测的样品,按碱基配对准则进行杂交。

4. 蛋白质工程

7)蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因组成,对先有蛋白质进行改造或制作新的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在准则上只能出产自然界已存在的蛋白质

二、克隆技能

1. 植物的安排培育

1)细胞工程:指运用细胞生物学和分子生物学的原理和办法,通过细胞水平或许细胞器水平上的操作,依照人们的志愿来改动细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门归纳科学技能。在细胞器水平上改动细胞的遗传物质,归于细胞工程。

2)细胞万能性:具有某种生物悉数遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完好生物体的潜能

考点细化:

 都具有该生物悉数遗传信息,因而从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有万能性。

 细胞在生物体内没有表现出万能性的原因是基因挑选性表达。

 植物细胞的万能性得以完结的条件是离体,适合的养分和激素,无菌操作。越轨阅历

 在生物的一切的细胞中,受精卵细胞的万能性最高。

3)植物安排培育:在无菌和人工操控的条件下,将离体的植物器官、安排、细胞,培育在人工装备的培育基上,花花世界何须确实给予适合的培育条件,诱导其发作愈伤安排、丛芽,终究构成完好的植株。

考点细化:

 已分解的细胞通过诱导后,失掉其特有的结构和功用而转变成未分解细胞的进程叫脱分解。

 再分解是愈伤安排持续进行培育,从头分解出根或芽等器官。

 愈伤安排细胞摆放疏松而无规矩,高度液泡化的呈不定型状况的薄壁细胞。

 植物安排培育时培育基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机增加物,与动物细胞培育比较需求蔗糖、植物激素,不需求动物青林歪弹血清。

 在植物安排培育脱分解进程中,需求植物激素

⑥ 植物安排培育全进程中都需求无菌,愈伤安排之前不需求光照

4)植物安排培育技能的用处:微型繁衍、作物脱毒、制作人工种子、单倍体育种、细胞产品的工厂化出产。

考点细化:

 用植物体的茎尖、根尖来取得无病毒植物

②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶,人工种子与正常种子比较发芽率高。

 转基因植物的培育需求植物安排培育

5)将不同种植物的体细胞,在必定条件下融组成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。

考点细化:

 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁取得原生质体

②confrence 物理办法:电影响、振动、离心;化学办法:聚乙二醇

 植物体细胞杂交完结的标志是新细胞壁的构成

 交融后的杂种细胞通过植物有点色安排培育才干发育成完好的植物体

6)植物体细胞杂交这一育种办法的最大长处是战胜远缘杂交不亲和妨碍

2.动物的细胞培育与体细胞克隆

7)动物细胞工程常用的技能手段有动产组词物细胞培育、动物细胞核移植、动物细胞交融、出产单克隆抗体、胚胎移植等

8)动物细胞培育通过原代培育和传代培育

考点细化:

 动物细胞培育液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等

② 动物细胞培育基液体,植物细胞培育基固体,培育的动物细胞一般取自胚胎、幼龄动物的安排器官

 动物细胞培育时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体,CO2 起到调理 PH值效果

 运用胰蛋白酶处理使动物安排涣散成单个细胞

 动物安排处理使细胞涣散后的初度培育称为原代培育

 贴满瓶壁的细胞需求从头用胰蛋白酶等处理,然后分瓶持续培育,让细胞持续增殖。这样的培育进程一般被称为传代培育。

3.细胞交融与单克隆抗体

(9)动物细胞交融与植物原生质体交融的差异:操作进程不同:植物原生质体交融需求先去除细胞壁,动物细胞无细胞壁;诱导办法不同:动物细胞交融能够用物理、化学和生物三种办法,植物原生质体交融只能用物理、化学办法;终究意图不同:植物原生质体交融终究是为了取得杂种植株,动物细胞交融最首要意图是取得单克隆抗体。

10)单克隆抗体与血清抗体比较特异性强、灵敏度高并可很多制备

11)了解单克隆抗体制备全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus进程。

考点细化

 出产杂交瘤细胞要用淋巴细胞和骨髓瘤细胞交融

 打针相应抗原后,从小鼠脾脏中提取出淋巴细胞

 杂交瘤细胞既能很多增殖,又能发作专注抗体。

 制备单克隆抗体进程中需求两次挑选

 体外条件下做大规划培育杂交瘤细胞或许打针到小鼠腹腔内增殖,从细胞培育液或许小鼠腹水内就能够提取出很多的单克隆抗体。

联想拓宽:

①杂交瘤细胞交融时,对 B 淋巴细胞为免疫过的淋巴细胞

②一种 B 细胞只能发作一种抗体

 B 两种细胞交融,只考虑两两交融,交融方法有 AABBAB 交融三种

④制备单克隆抗体进程中需求通过两次挑选?第一次挑选出杂交瘤细胞(用挑选培育基挑选)(培育基中参加特定化学物质)。

第2次挑选出能发作特定抗体的杂交瘤细胞(抗体—抗原杂交检测)(培育基中参加特定抗原)。

13)单克隆抗体在多种人类疾病及动植物病害的确诊和病原判定中发挥隐秘情事重要效果。首要用于癌症医治,也有少数用于其它疾病医治。

拓宽:生物导弹中,单抗的效果是导向效果,能将药物定向带到癌细胞所在方位,在原位杀死癌细胞。既不损害正常细胞,又减少了用药量。

14)去核卵母细胞能够激起核的万能性,选用的卵母细胞应该是培育到减数第2次割裂中期的卵母细胞

15)核移植技能取得的动物由于有细胞质基因的影响、生活环境的差异、或许发作基因突变构成核移植动物与供核动物性状不完全相同。街拍皮裤

三、胚胎工程

1. 动物胚胎发育的根本进程与胚胎工程的理论根底

动物胚胎发育的根本进程:受精卵→2细胞→4细胞→8细胞→桑葚胚→囊胚→原肠胚

胚胎工程的理论根底:哺乳动物受精和前期胚胎发育规则

1)精子和卵子的发作过星降注程中精子变形,卵子新八唧没有。卵泡的构成和在卵巢内的储藏,是在出生前完结的。

考点细化:

①精细胞发作后要通过顶体构成、尾部发育、细胞质浓缩终究精子构成

②卵子的发作在胎儿时期就完结了卵泡的形赵景强成和在卵巢内的储藏,排卵前后进行了减数第一次割裂,减Ⅱ割裂在精子和卵细胞结合进程中完结。

2)精、卵细胞结合前各自要发作哪些生理进程?(提示:在受精前精子要在雌性动物生殖道内获能;排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减Ⅱ中期才具有受精才干)。

3)受精进程:精子获能→卵子预备阶段→受精。卵子避免多精入卵的屏障:通明带反响和卵细胞膜反响

拓宽:

 桑椹胚一般指 32 个左右的细胞数意图胚胎。

② 胚胎切割选用的胚胎最好处于桑椹胚或许囊胚时期,由于万能性较高

6)胚胎工程包含的技能:体外受精技能、胚胎前期培育技能、胚胎干细胞培育、胚胎切割技能、胚胎移植技能

(7)取得精子必须经获能处理后才干进行体外受精

(8)搜集卵子前一般要对全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus雌体进行促性腺激素处理,从较大体型动物卵巢中搜集卵母细胞都要通过体外人工培育成熟后,才干与获能精子受精。

(9)胚胎的前期培育培育液还需求增加激素和血清

10)取得的前期胚胎有向受体移植、冷冻保存两种去向

2. 胚胎干细胞的移植

11)从前期胚胎或原始性腺中别离出来的一类细胞能够称为胚胎干全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus细胞

12)胚胎干细胞在形状上:体积小、细全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus胞核大、核仁显着;在功用上,具有发育的万能性。另外在体外培育的条件下,胚胎干细胞能够增殖二不发作分解。对它能够进行冷冻保存,也可进行遗传改造。

13)干细胞按分解潜能可分为万精干细胞(如胚胎干细胞能够分解构成一切的成体安排细胞,乃至发育成为完好的个别)、 多精干细胞(具有多向分解的潜能,能够分解构成除本身安排细胞外的其他安排细胞,如造血干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、皮肤干细胞等)和专精干细胞(保持某一特定安排细胞的自我更新,如肠上皮干细胞)三品种型。

14)干细胞能够通过从哺乳动物的前期胚胎(囊胚的内细胞团)或从胎儿的原始性腺中别离而来

3. 胚胎工程的运用

(15)胚胎切割时要留意留意将内细胞团平等切割。

16)胚胎移植技能包含对供、受体的挑选和处理,陆燃喻夏配种或进行人工授精,对胚胎的搜集(冲卵),查看、培育或保存,对胚胎进行全本小说,选修三生物知识点,iphone6splus移植,以及移植后的查看等进程

考点细化:

 胚胎移植的生理学根底:

a.哺乳动物发情排卵后,不管是否妊娠,在一段时刻内同种动物的供、受体生殖器官的生理改变是相同的,这为胚胎移入受体供给了相同的生理环境

b.前期胚胎在必定时刻内处于游离状况,为胚胎的搜集供给了或许

c.受体对移入子宫的外来胚胎根本上不发作免疫排挤反响,为胚胎在受体内的存活供给了或许

d.供体胚胎可与受体子宫树立正常的生理和安排联络,但移入受体的供体胚胎的遗传特性,在孕育进程中不受任何影响。

②胚胎移植的本质是出产胚胎的供体和孕育胚胎的受体一起繁衍子孙的进程。

③胚胎移植的优势是能够充分发挥雌性优秀个别的繁衍潜力。

④胚胎移植进程中两次运用激素的意图是:第一次,对供体、受体进行同期发情处理,打针孕激素;第2次,对供体母牛做超数排卵处理,打针促性腺激素。

⑤胚胎移植进程产下的犊牛性状取决于供体牛

⑥不同动物其胚胎移植的时刻不同,例如:牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才干进行移植,小鼠等可在更早的阶段移植。



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